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摘要:豬變形桿菌病是由奇異變形桿菌引起的豬的一種細菌性傳染病。病原是一種無(wú)芽孢、無(wú)莢膜的革蘭氏陰性桿菌,該菌為條件性致病菌,能引起急性發(fā)病,發(fā)病率和死亡率較高,感染后可使耐過(guò)動(dòng)物的生長(cháng)發(fā)育嚴重受阻,給養殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟損失,并且還會(huì )引起人類(lèi)的原發(fā)性或繼發(fā)性感染,造成人類(lèi)食物中毒,已經(jīng)成為人畜共患疫病,需要引起高度重視。本文對奇異變形桿菌的特性、豬奇異變形桿菌病的臨床癥狀、病理變化、實(shí)驗室診斷以及綜合防治措施等進(jìn)行了介紹,以期為規?;i場(chǎng)預防控制該病提供借鑒。
關(guān)鍵詞:豬奇異變形桿菌??;臨床癥狀;診斷及防制
近年來(lái),由豬奇異變形桿菌引起的感染呈現日益增長(cháng)趨勢,導致許多豬場(chǎng)不斷爆發(fā)流行,已成為危害我國養豬業(yè)的一種細菌性傳染病,該病的發(fā)生與機體的抵抗力密切相關(guān)。平時(shí)加強豬群的飼養管理,提高機體防御能力,對預防該病十分關(guān)鍵。同時(shí),由于其還可以引起人類(lèi)的原發(fā)性或繼發(fā)性感染,造成人類(lèi)食物中毒。因此,對這種人畜共患疫病應引起高度重視,采取綜合性措施加以防控。
1 病原與流行病學(xué)
變形桿菌(Proteusvulgaris)是人和動(dòng)物的寄生菌和病原菌。變形桿菌屬于腸桿菌科,包括普通變形桿菌、奇異變形桿菌、莫根變形桿菌、雷極變形桿菌和無(wú)恒變形桿菌,其中奇異變形桿菌(Proteusmirabilis,PM)是致病性較為嚴重的致病菌,廣泛分布于人和動(dòng)物的體表、黏膜及消化道,其產(chǎn)生的毒素可引起中毒,是一種常見(jiàn)的條件性致病菌,當機體免疫力下降時(shí),PM可以感染人和動(dòng)物引起發(fā)病。
豬奇異變形桿菌屬于腸桿菌科、變形桿菌屬,是革蘭氏陰性細菌,有鞭毛,變形桿菌呈明顯的多形性,有球形和絲狀形,為周身鞭毛菌,運動(dòng)活潑。該菌對營(yíng)養要求不高,在固體培養基上呈擴散生長(cháng),形成以菌種部位為中心的厚薄交替、同心圓形的層層波狀菌苔。在培養基中添加 0.1%石碳酸或 0.4%硼酸,可以抑制其擴散生長(cháng),形成一般的單個(gè)菌落。在 ss平板上可以形成圓形、扁薄、半透明的菌落。培養物有特殊臭味,在血瓊脂平板上有溶血現象。
2 臨床癥狀與病理變化
近年來(lái),在我國豬、雞和犢牛中均有奇異變形桿菌病發(fā)病報道,特別是在豬群中呈現不斷增加趨勢,已成為危害我國養豬業(yè)的一種嚴重的細菌性傳染病。由于該菌為條件性致病菌,能引起急性發(fā)病,發(fā)病率和死亡率較高,感染后可使耐過(guò)動(dòng)物的生長(cháng)發(fā)育嚴重受阻,給養殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟損失;同時(shí),還可以引起人類(lèi)的原發(fā)性或繼發(fā)性感染,造成人類(lèi)食物中毒,應引起高度重視。
2.1 臨床癥狀。豬感染該病后臨床上以發(fā)熱、咳嗽氣喘、腹瀉、嘔吐為特征。發(fā)病初期食欲廢絕,皮膚蒼白,被毛粗亂,體溫升高,嘔吐,腹瀉,水樣糞便中有黏液,具有腐敗臭味。繼而咳嗽氣喘,呼吸加快,當體溫升高至41℃以上時(shí),病豬呼吸急促,呈犬坐狀腹式呼吸,張口伸舌;大多數病豬四肢乏力,步態(tài)不穩,腹部皮膚潮紅,眼結膜充血,頸下與腹下發(fā)紺;重癥者鼻孔可流出泡沫樣黏液,嚴重的可發(fā)生敗血癥而造成死亡。
2.2 病理變化。病死豬肺部明顯腫脹,觸之堅實(shí),肺的尖葉與心葉彌漫性出血,隔葉有出血斑塊,氣管和支氣管內充以大量白色泡沫樣黏液,肺與心包有的與胸膜粘連。肺門(mén)淋巴結腫脹,充血出血,橫切面濕潤,呈大理石樣變。胃黏膜潰瘍,易脫落,胃底部充血、出血??漳c與回腸黏膜有微量出血和潰瘍,腸壁增生、腫脹,腸內容物呈灰黃色或黃綠色,附有黏液,且具有特殊氣味,小腸黏膜彌慢性出血,腸系膜淋巴結水腫。
2.3 病理組織學(xué)變化。取病死豬的肺與腸等組織,用 10%甲醛固定,石蠟包埋切片,HE染色,顯微鏡下觀(guān)察發(fā)現肺細支氣管周?chē)罅苛馨图毎?,其黏膜上皮壞死、脫落。黏膜下層血管充血,并有多量淋巴細胞和少量單核吞噬細胞浸潤,肺泡壁充血,肺泡內有滲出的細胞,與單核吞噬白細胞形成含鐵血黃素。肝淤血,肝細胞變性。小腸絨毛上皮壞死、脫落,黏膜層和黏膜下層血管充血,有單核吞噬細胞、嗜酸中性白細胞、酸性 白細胞浸潤,腸絨毛和腸腺杯狀細胞明顯擴大。肺門(mén)淋巴結、淋巴小結數量增多,明顯擴大,淋巴竇內皮活化,有較多的單核吞噬細胞,淋巴結內血管充血。腎小球血管內皮輕度增生,腎小管上皮顆粒變性或壞死,腎小管腔內有尿圓柱。
3 實(shí)驗室診斷
3.1 細菌分離與鑒定。分離細菌可用病豬的胃、小腸、盲腸內容物及結腸黏膜、腸系膜淋巴結、肺臟及肺門(mén)淋巴結等。采集病豬病料,分別接種于鮮血瓊脂平板和普通肉湯培養基中,將接種的鮮血瓊脂平板放置于37℃下培養 24h后,可見(jiàn)由細菌接種點(diǎn)向周?chē)w徙性擴散生長(cháng)的灰色平鋪菌落,且以接種點(diǎn)為中心形成水波紋狀圓心圈,覆蓋整個(gè)平板上。另外,血平板變黑,散發(fā)出特殊的腐敗性臭味。普通肉湯培養基于 37℃下培養 24h后呈均勻混濁樣,并有氣泡產(chǎn)生。培養物經(jīng)革蘭氏染色,觀(guān)察均可見(jiàn)革蘭氏陰性桿菌,大小不等但較為一致,無(wú)芽孢和莢膜。分離的細菌接種于麥康凱平板中,沒(méi)有粉紅色菌落形成。
3.2 生化鑒定。將分離的細菌按照豬奇異變形桿菌的生化特性進(jìn)行生化試驗,應與該菌的生化特性相符合。
3.3 動(dòng)物致病性試驗。取已培養 24 h的肉湯培養物按照0.2ml/只的劑量腹腔注射試驗組小白鼠4只;對照組 4只小白鼠則腹腔注射生理鹽水 0.2mE/只。試驗組小白鼠在接種肉湯培養物后 24~48h期間相繼出現腹瀉癥狀,并陸續全部死亡。對照組小白鼠沒(méi)有異常表現。取死亡小白鼠的肝臟接種于鮮血瓊脂平板中,于 37℃下培養 24h后可見(jiàn)鮮血瓊脂平板上生長(cháng)有遷徙性擴散的灰色平鋪菌落。取該灰色平鋪菌落進(jìn)行革蘭氏染色并鏡檢,可見(jiàn)革蘭氏陰性、大小不等的桿菌。對照組的小白鼠的肝臟接種于鮮血瓊脂平板中,37℃恒溫箱培養 24h后沒(méi)有觀(guān)察到任何菌落。
3.4 分子生物學(xué)檢測。林紅樂(lè )等針對編碼奇異變形桿菌脲酶調節子的基因序列設計 2條 PCR引物,擴增片段長(cháng)度為 225bp,結果發(fā)現 PCR檢測 PM的結果與傳統培養方法一致,PCR方法較傳統培養方法更加快捷,在 4h內即可完成擴增反應,PCR方法敏感度可達 30cfu/ml。蘇良等也針對奇異變形桿菌脲酶調節子編碼基因特異性序列的 6個(gè)位點(diǎn)設計 4條 LAMP引物,建立一種檢測奇異變形桿菌快速且特異的環(huán)介導等溫擴增(AMP)檢測方法,該方法檢測奇異變形桿菌的特異性與普通 PCR相同,但其敏感性比普通 PCR高10倍,且檢測速度更快,在 60min內即可完成擴增反應。
4 綜合防制措施
豬變形桿菌作為僅次于沙門(mén)氏菌的致病菌,近年來(lái)引發(fā)的畜禽感染事件屢見(jiàn)不鮮,了解變形桿菌的特征,對于獸醫臨床分離鑒定與正確診斷、合理應用抗生素和減少耐藥菌株的產(chǎn)生和傳播,針對性強化飼養管理具有十分重要的意義。
4.1 加強飼養管理。預防該病首先必須加強生物安全管理和改善飼養管理,對環(huán)境、飼料、飲水供應等的管理應嚴格加強,改善豬舍的衛生條件,特別注意防寒和通風(fēng),降低飼養密度,保持圈舍干燥。在各階段盡量實(shí)行全進(jìn)全出,以便豬舍在全部豬出欄后徹底消毒。
4.2 藥物治療。臨床實(shí)踐表明,豬變形桿菌極易對常用抗生素產(chǎn)生耐藥性。藥敏試驗結果證明,奇異變形桿菌對一代頭孢菌素頭孢唑啉耐藥率為 100%,對二代頭孢呋辛的耐藥率為51.9%,對氨芐西林的耐藥率為 73.7%,對諾氟沙星的耐藥率為50%。因此在確診該病后,應根據藥敏試驗結果,選用敏感性高的抗菌藥物(如頭孢噻呋、氟苯尼考、恩諾沙星、多西環(huán)素、復方阿莫西林等)進(jìn)行治療。同時(shí),對有嚴重脫水的仔豬,則需要加服補液鹽和電解多維溶液。為預防該病的再次發(fā)生,養殖場(chǎng)可在飼料中有計劃地分批交替添加敏感抗菌藥物進(jìn)行預防,最大限度地減少致病菌感染。
5 小結及討論
變形桿菌雖然是一種不常見(jiàn)的腸桿菌,但近年來(lái)由本菌引起的感染越來(lái)越多,主要集中在豬、雞鴨和犢牛養殖中,感染后可使耐過(guò)動(dòng)物的生長(cháng)發(fā)育嚴重受阻。豬感染該病后臨床上以發(fā)熱、咳嗽氣喘、腹瀉、嘔吐為特征,嚴重的可發(fā)生敗血癥而造成死亡。由于變形桿菌具有強大的變異性和耐藥性,在平時(shí)預防和治療中,需要通過(guò)藥敏試驗選擇高敏藥物。豬場(chǎng)平時(shí)應加強消毒,注意清潔衛生,實(shí)行全進(jìn)全出;同時(shí)鑒于本菌可人畜共患,需嚴密防范生產(chǎn)人員的原發(fā)或繼發(fā)感染。